Production and in vitro Evaluation of Recombinant Human HB-EGF for Wound Healing and Targeted Therapy
Loading...
Date
2025
Authors
Vovk, I.
Didan, A.
Zhukova, Dariia
Dronko, Liliia
Rebriev, Andrew
Rybalko, A.
Legach, E.
Gorbatiuk, Oksana
Usenko, Mariia
Skvarchynskyi, Andrii
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Abstract
Aim. The goal of the study was to evaluate the biological activity of recombinant human heparinbinding EGF-like growth factor (rhHB-EGF) on mouse fibroblasts in vitro and the possibility of its use as a potential agent for promoting wound healing and tissue regeneration. Methods. The study employed a scratch assay to evaluate the migration of mouse fibroblasts (L929 and NIH-3T3), the MTT test to assess cell proliferation and/or metabolic activity, MALDI-TOF mass spectrometry for protein identification, and flow cytometry to determine cell viability. Results. In the concentration range of 500–1000 ng/ml rhHB-EGF, no cytotoxic effect was recorded, but an increase in proliferation and/or metabolic activity, as well as migration of fibroblasts, was detected, with a maximum effect at 500 ng/ml rhHB-EGF in the cell incubation medium. A 30% overgrowth of the wound surface of fibroblasts was demonstrated in the scratch assay test under the influence of rhHB-EGF compared to the corresponding control. Conclusions. rhHB-EGF at a concentration of 500 ng/ml can be used in preparations to stimulate wound healing and tissue regeneration due to its ability to stimulate proliferation/metabolic activity and migration of fibroblasts, as well as the lack of cytotoxicity. Further, in vivo studies are needed for a comprehensive evaluation of this possibility.
Description
Мета. Оцінювання біологічної активності рекомбінантного гепарин-зв’язувального EGF-подібного фактора росту людини (rhHB-EGF) на фібробластах миші in vitro та можливості його застосування як потенційного агента для стимулювання загоєння ран та регенерації тканин. Методи. У дослідженні застосовували міграційний тест (scratch assay) для вивчення міграції фібробластів миші (L929 та NIH-3T3), MTT-тест для оцінювання проліферації та/або метаболічної активності клітин, MALDI-TOF мас-спектрометрію для ідентифікації протеїнів і проточну цитометрію для визначення життєздатності клітин. Результати. У діапазоні концентрацій 500–1000 нг/мл rhHB-EGF не зафіксовано цитотоксичного ефекту. Натомість виявлено підсилення проліферації та/або метаболічної активності, а також міграції фібробластів з максимальним ефектом при 500 нг/мл rhHB-EGF у середовищі інкубації клітин. Продемонстровано 30% заростання раневої поверхні фібробластів у scratch assay-тесті за впливу rhHB-EGF порівняно з відповідним контролем. Висновки. rhHB-EGF у концентрації 500 нг/мл може використовуватися у складі препаратів для стимулювання загоєння ран і регенерації тканин завдяки здатності стимулювати проліферацію/метаболічну активність та міграцію фібробластів, а також відсутності цитотоксичності. Для докладного вивчення цієї можливості надалі є необхідним проведення відповідних досліджень in vivo.
Keywords
human heparin-binding EGF-like growth factor (rhHB-EGF), recombinant protein, cell culture, fibroblasts, proliferation, migration, cytotoxicity, wound healing, article, гепарин-зв’язувальний EGF-подібний фактор росту людини (rhHB-EGF), рекомбінантний протеїн, культура клітин, фібробласти, проліферація, міграція, цитотоксичність, загоєння ран
Citation
Production and in vitro Evaluation of Recombinant Human HB-EGF for Wound Healing and Targeted Therapy / I. Vovk, A. Didan, D. Zhukova, L. Dronko, A. Rebriev, A. Rybalko, E. Legach, O. Gorbatiuk, M. Usenko, A. Skvarchynskyi, T. Dovbymchuk, A. Siromolot, S. Romaniuk, D. Kolybo // Biotechnologia Аcta. - 2025. - Vol. 18, No. 1. - P. 55-66. - https://doi.org/10.15407/biotech18.01.055