Кафедра лабораторної діагностики біологічних систем
Permanent URI for this collection
Browse
Recent Submissions
Item HB-EGF as a Targeted Carrier for Drug Delivery in Some Cancers(2025) Gamaliia, Inna; Siromolot, Andriy; Kolybo, DenysCell-penetrating peptides (CPPs) facilitate efficient biomolecule delivery with low immunogenicity and cytotoxicity, making them ideal for in vivo drug delivery. Heparin-binding epidermal growth factorlike growth factor (HB-EGF), a ligand of the epidermal growth factor receptor (EGFR), is overexpressed in tumors and can promote angiogenesis. Doxorubicin (DOX), a chemotherapeutic, treats various cancers but has limited use with HB-EGF as a carrier. Aim. In this study we focused on the HB-EGF’s potential in enhancing DOX delivery and antitumor effects. Methods. Recombinant sHB-EGF was expressed in E. coli, purified by IMAC, and loaded with DOX with further dialysis of the complex from unbound antibiotics. Binding to cell surfaces (A431, 3T3, Vero), as well as ROS production using DCFH-DA, were analyzed by flow cytometry. Cell viability was assessed with MTT assays after 48 h. Results. sHB-EGF fluorescent derivatives effectively bound to A431 cells, enhancing DOX delivery to squamous-cell carcinoma and significantly reducing cell viability. Conclusions. HB-EGF efficiently delivers DOX into cells, suggesting its potential as a targeted drug carrier for EGFR/ErbB-1 overexpressed cancers.Item Production and in vitro Evaluation of Recombinant Human HB-EGF for Wound Healing and Targeted Therapy(2025) Vovk, I.; Didan, A.; Zhukova, Dariia; Dronko, Liliia; Rebriev, Andrew; Rybalko, A.; Legach, E.; Gorbatiuk, Oksana; Usenko, Mariia; Skvarchynskyi, Andrii; Dovbymchuk, T.; Siromolot, Andriy; Romaniuk, Svitlana; Kolybo, DenysAim. The goal of the study was to evaluate the biological activity of recombinant human heparinbinding EGF-like growth factor (rhHB-EGF) on mouse fibroblasts in vitro and the possibility of its use as a potential agent for promoting wound healing and tissue regeneration. Methods. The study employed a scratch assay to evaluate the migration of mouse fibroblasts (L929 and NIH-3T3), the MTT test to assess cell proliferation and/or metabolic activity, MALDI-TOF mass spectrometry for protein identification, and flow cytometry to determine cell viability. Results. In the concentration range of 500–1000 ng/ml rhHB-EGF, no cytotoxic effect was recorded, but an increase in proliferation and/or metabolic activity, as well as migration of fibroblasts, was detected, with a maximum effect at 500 ng/ml rhHB-EGF in the cell incubation medium. A 30% overgrowth of the wound surface of fibroblasts was demonstrated in the scratch assay test under the influence of rhHB-EGF compared to the corresponding control. Conclusions. rhHB-EGF at a concentration of 500 ng/ml can be used in preparations to stimulate wound healing and tissue regeneration due to its ability to stimulate proliferation/metabolic activity and migration of fibroblasts, as well as the lack of cytotoxicity. Further, in vivo studies are needed for a comprehensive evaluation of this possibility.Item Доімплантаційний розвиток ембріонів жінок старшого репродуктивного віку(2014) Чапля, Ольга; Гонтар, Ю.; Білько, НадіяДосліджували морфокінетичні характеристики еуплоїдних і хромосомно незбалансованих ембріонів, отриманих у випадку заплідення in vitro ооцитів 58 молодих жінок і 28 пацієнток старшого репродуктивного віку. Частка ембріонів із нормальним хромосомним набором із віком жінки зменшувалася до 39,9% у групі ембріонів молодих пацієнток і 25,2% у когорті зразків жінок старшого репродуктивного віку. За результатами оцінки темпів розвитку нормальних та аберантних ембріонів установлено, що еуплоїдні ембріони розвивалися швидше, а в разі пролонгованого культивування формують бластоцисти у півтора раза частіше. Однак суттєвих відмінностей за морфокінетичними характеристиками зразків з аналогічними хромосомними наборами між досліджуваними віковими групами не виявлено. Зростання відносної кількості хромосомно незбалансованих ембріонів на фоні сталої дії природного добору на доімплантаційному етапі розвитку може бути однією з передумов підвищення вірогідності народження дитини з генетичними аномаліями у жінок старшого репродуктивного віку.Item Аналіз впливу рекомбінантних цитокінів на колонієутворюючий потенціал гемопоетичних клітин-попередників при мієлодиспластичному синдромі in vitro(2026) Луніна, Карина; Пахаренко, Маргарита; Білько, НадіяMетою було вивчення впливу рекомбінантних цитокінів на колонієутворюючий потенціал гемопоетичних клітин-попередників при мієлодиспластичному синдромі (МДС) у формі рефрактерної анемії з надлишком бластів-I (РАНБ-I).Item Прогнозування відповіді на імуномодулюючу терапію як елемент стратегії запобігання невідкладним станам при мієлодиспластичному синдромі(2026) Стародуб, Галина; Третяк, Наталія; Горяінова, Надія; Білько, НадіяАктуальність. Одним із ключових патогенетичних механізмів при мієлодиспластичному синдромі (МДС) є порушення мікрооточення гемопоетичної стовбурової клітини, що супроводжується змінами в секреції прозапальних цитокінів, зокрема фактора некрозу пухлини альфа (TNF- ). З огляду на імунозапальну природу патогенезу МДС застосування імуномодулюючих препаратів, зокрема леналідоміду, показало клінічну ефективність у пацієнтів з низьким ризиком. Мета: оцінити клініко-гематологічний стан і колонієутворювальну активність клітин кісткового мозку у хворих на мієлодиспластичний синдром з рефрактерною анемією з надлишком бластів І (МДС РАНБ І) залежно від концентрації TNF- в сироватці крові. Матеріали та методи. Обстежено 27 пацієнтів, які отримували леналідомід. Рівень TNF- у сироватці визначали за допомогою твердофазного імуноферментного аналізу (ELISA) із застосуванням наборів стандартного виробництва. Аналіз проводили на імуноферментному аналізаторі Multiscan EX ( = 430 нм). Контролем слугувала плазма здорових донорів. Результати. Встановлено, що зниження TNF- супроводжується клінічним поліпшенням, зростанням еритропоезу і підвищенням колонієутворення in vitro. Концентрація TNF- у сироватці крові вірогідно знижується в пацієнтів з МДС РАНБ І при досягненні повної або часткової відповіді на терапію леналідомідом. Рівень TNF- демонструє високу прогностичну точність (AUC = 1,00) для диференціації відповіді на лікування. Функціональна активність клітин-попередників (КУО-ГМ) і рівень CD34+/CD117+ у кістковому мозку мають обернену залежність від TNF- . Показово, що в групі хворих на МДС РАНБ І, які не відповіли на терапію леналідомідом, було констатовано погіршення загального стану внаслідок поглиблення анемії, що можна оцінювати як клінічну ситуацію для корекції терапевтичного маршруту з метою запобігання невідкладним станам. Висновки. Отримані результати підтверджують доцільність включення TNF-та колонієутворення до комплексу діагностичних маркерів для стратифікації ризику і прогнозування перебігу МДС.Item Експериментальні підходи у вивченні біологічної дії іонізуючого випромінювання : навчально-методичний посібник(Національний університет "Києво-Могилянська академія", 2021) Руссу, ІринаУ навчально-методичному посібнику І. З. Руссу, доцентки кафедри лабораторної діагностики біологічних систем НаУКМА, проаналізовано основні методи, які застосовують під час дослідження наслідків дії іонізуючої радіації на живий організм. Посібник рекомендовано студентам-біологам, фахівцям радіобіології, лабораторної діагностики і медицини.Item Оцінка морфофункціонального стану гемопоетичних клітин-попередників кордової крові для подальшої трансплантації(2013) Білько, Денис; Борбуляк, Ірина; Білько, НадіяМетою даної роботи було оцінити морфологічні особливості та функціональну активність ранніх гемопоетичних клітин-попередників кордової крові як потенційного трансплантата.Item Характеристики клітин-попередників кісткового мозку як один із критеріїв оцінки індивідуальної відповіді пацієнтів із хронічною мієлоїдною лейкемією на терапію інгібітором тирозинових кіназ(2013) Дяченко, Марія; Жалейко, Ілона; Дягіль, Ірина; Перехрестенко, Тетяна; Білько, НадіяМета: проаналізувати функціональні особливості клі тин-попередників кісткового мозку (КМ) пацієнтів з хронічною мієлоїдною лейкемією (ХМЛ) залежно від ефективності їх лікування для визначення можливої цінності характеристик цих клітин у культурі in vitro в прогнозі перебігу ХМЛ. Об’єкт і методи: аспірати КМ 32 пацієнтів з ХМЛ, які отримували терапію препаратом іматиніб (25 осіб) або гідроксикарбамідом (7 осіб) та характеризувалися різною (оптимальна, субоптимальна) відповіддю на лікування, досліджували гематологічним, культуральним, цитологічним та імуногістохімічним методами. Результати: встановлено, що функціональна активність (формування колоній і кластерів у культурі in vitro) клітин- попередників КМ пацієнтів з оптимальною відповіддю на терапію була нижчою, ніж до лікування із застосуванням іматинібу, або у пацієнтів з субоптимальною відповіддю. Проліферативний потенціал КМ пацієнтів з наявністю Ph+ клітин був вищим, ніж у пацієнтів з повною гематологічною та цитогенетичною відповіддю на терапію. Колонії та кластери, отримані в культурі КМ пацієнтів із субоптимальною відповіддю на терапію іматинібом, характеризувалися підвищеним відносним вмістом CD34+-клітин-попередників. Встановлено сильну позитивну статистично достовірну кореляцію між кількістю Ph+ клітин та кількістю клітинних агрегатів у культурах КМ пацієнтів, які отримували терапію гідроксикарбамідом, а також між індексом дозрівання клітин в клітинних агрегатах та тривалістю лікування іматинібом. Висновок: відповідь на терапію ХМЛ (із застосуванням інгібітора тирозинкінази BCR-ABL іматинібу), ймовірно, пов’язана зі змінами в популяції лейкемічних стовбурових клітин та клітин-попередників КМ, зокрема змінами їх проліферативного потенціалу, що може бути використано для моніторингу індивідуальної ефективності лікування.Item Диференціювання у кардіоміоцити окремих клонів індукованих плюрипотентних стовбурових клітин миші(2013) Малишева, C.; Будаш, Галина; Білько, Надія; Хешлер, Ю.Оцінювали ефективність диференціювання у кардіоміоцити окремих клонів індукованих плюрипотентних стовбурових клітин миші. Останні отримані у попередніх дослідженнях внаслідок репрограмування мишиних ембріональних фібробластів системою плазмід Sleeping beauty, заснованою на транспозонах. Диференціювання здійснювали у суспензійній культурі та при прикріпленні ембріоїдних тілець до культуральних планшет. Як індуктор використовували аскорбінову кислоту. Згідно з отриманими результатами, дифереціювання при прикріпленні ембріоїдних тілець відбувається на порядок ефективніше. Аскорбінова кислота стимулює отримання кардіоміоцитів.Item Особенности мейотической сегрегации хромосом 13 и 14 у гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14)(q10;q10)(2014) Пилип, Лариса; Спиненко, Людмила; Зукин, Валерий; Билько, НадеждаПредставлены результаты исследования особенностей мейотической сегрегации хромосом 13 и 14 в сперматозоидах пяти гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14) методом флюоресцентной гибридизации in situ. Выявлено преобладание альтернативного типа сегрегации хромосом (78,2 ± ± 5,7 %) с незначительным варьированием частот сбалансированных сперматозоидов (69,4—86,5 %). Сегрегацию по совместному типу с образованием несбалансированных гамет выявляли в 18,64 ± 4,90 % сперматозоидов, по типу 3:0 — в 2,48 ± 1,20 % сперматозоидов. Полученные результаты можно использовать для медико-генетического консультирования гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14), особенно для прогнозирования вероятности получения нормальных/сбалансированных эмбрионов при проведении циклов вспомогательных репродуктивных технологий.Item Ascorbic Acid-Induced Cardiac Differentiation of Murine Pluripotent Stem Cells : Transcriptional Profiling and Effect of a Small Molecule Synergist of Wnt/β-Catenin Signaling Pathway(2025) Ivanyuka, Dina; Budasha, Galina; Zhenga, Yunjie; Gaspara, John Antony; Chaudhari, Umesh; Fatima, Azra; Bahmanpour, Soghra; Grin, Vladislav K.; Popandopulo, Andrey G.; Sachinidisa, Agapios; Hescheler, Jürgen; Saric, TomoBackground: Reproducible and efficient differentiation of pluripotent stem cells (PSCs) to cardiomyocytes (CMs) is essential for their use in regenerative medicine, drug testing and disease modeling. The aim of this study was to evaluate the effect of some previously reported cardiogenic substances on cardiac differentiation of mouse PSCs. Methods: Differentiation was performed by embryoid body (EB)-based method using three different murine PSC lines. The differentiation efficiency was monitored by RT-qPCR, immunocytochemistry and flow cytometry, and the effect mechanistically evaluated by transcriptome analysis of treated EBs. Results: Among the five tested compounds (ascorbic acid, dorsomorphin, cyclic adenosine 3',5'-monophosphate, cardiogenol C, cyclosporin A) only ascorbic acid (AA) exerted a strong and reproducible cardiogenic effect in CGR8 cells which was less consistent in other two PSC lines. AA induced only minor changes in transcriptome of CGR8 cells after administration during the initial two days of differentiation. Cardiospecific genes and transcripts involved in angiogenesis, erythropoiesis and hematopoiesis were up-regulated on day 5 but not on days 2 or 3 of differentiation. The cardiac differentiation efficiency was improved when QS11, a small-molecule synergist of Wnt/p-catenin signaling pathway, was added to cultures after AA-treatment. Conclusion: This study demonstrates that only minor transcriptional changes are sufficient for enhancement of cardiogenesis of murine PSCs by AA and that AA and QS11 exhibit synergistic effects and enhance the efficiency of CM differentiation of murine PSCs.Item Вплив мезенхімальних стромальних клітин кісткового мозку на функціонування гемопоетичних клітин за сублетального опромінення(2025) Руссу, Ірина; Білько, НадіяМета: дослідження впливу мезенхімальних стромальних клітин на функціонування гемопоетичних клітин мишей лінії Balb/C після дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі в культурі клітин in vitro та in vivo. Методи. Для вивчення впливу стромального мікрооточення було використано модель співкультивування кровот" ворних клітин опромінених тварин та мезенхімальних клітин, що формують фідерні шари, у культурі in vitro. За допомогою барвника трипанового синього проведено оцінку кількості гемопоетичних клітин з ушкодженням цитоп" лазматичної мембрани та визначено рівень клітинної загибелі. Культивування клітин у культурі дифузійних камер in vivo дозволило оцінити проліферативний потенціал гемопоетичних стовбурових клітин кісткового мозку опромінених тварин. Результати. Дослідження взаємодії між стромальними та гемопоетичними клітинами кісткового мозку мишей Balb/C дозволило виявити модифікуючий вплив строми на рівень інтерфазної та репродуктивної загибелі клітин-попередників внаслідок дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі. Зокрема, через 2 доби відсоток загиблих клітин у суспензії з безпосереднім контактом зі стромою in vitro був зниженим порівняно з гемопоетичними клітинами, де такий контакт був відсутнім: (40,5 ± 2,6) % проти (60,1 ± 2,8) %. Спостерігалося також підвищення кількості клітинних агрегатів у культурах опромінених клітин-попередників, які заздалегідь взаємодіяли з мезенхімальними стромальними клітинами in vitro (25,2 ± 1,9 КУО), у порівнянні з клітинами, які напряму не взаємодіяли зі стромою (15,3 ± 2,8 КУО). Висновки. Співкультивування зі стромальними клітинами суттєво знижувало рівень радіаційно індукованої загибелі гемопоетичних клітин кісткового мозку та підвищувало їхню колонієутворюючу активність, проте для цього був потрібен безпосередній контакт із стромою у культурі in vitro.Item Functional activity of CD34-positive cells in chronic myeloid leukemia patients with different response to imatinib therapy [electronic resource](2020) Sviezhentseva, Ilona; Perekhrestenko, T.; Bilko, Denys; Gordienko, A.; Diachenko, M.; Dyagil, IrynaIt is believed that the reason of the leukemic clone cell resistance to treatment with tyrosine kinase inhibitors during chronic myeloid leukemia (CML) is mutations in the genome of an early bone marrow progenitor cells that are CD34-positive. Such cells, regardless of treatment, acquire ability to proliferation and differentiation. This leads to the re-expansion of the CD34+ cells. Aim: to determine the CD34 antigen expression in bone marrow and peripheral blood cells in CML patients with different response to imatinib therapy using the results of hematopoietic cells culturing and the data of flow cytometry. Methods: Bone marrow aspirate from 39 patients who were treated with imatinib was studied with cytogenetic, flow cytometry and culture methods in vitro. Results: In patients with an optimal response to imatinib therapy the number of colonies was 1.8 times lower than the number of those in the group of patients with a suboptimal response to therapy. In turn, in patients with failure of imatinib therapy the number of colonies was the highest and was 2.1 times higher than the patients with optimal response. The results of cytometric studies have shown that the number of CD34+ cells in bone marrow was significantly higher compared to the number of CD34+ cells in peripheral blood cells and increased with the acquisition of leukemic cells the resistance to imatinib. There was a direct correlation between the number of colonies and clusters in semisolid agar in vitro and the number of CD34+ cells in the bone marrow of patients. Conclusions: The correlation between the number of CD34+ cells and the number of cell aggregates in semisolid agar in vitro indicates the prognostic value of the method for determining CD34+ cells in the patient bone marrow. The parallel increase of their number in the peripheral blood will allow developing express methods for the detection of individual patient response to imatinib therapy.Item Особливості функціонування мезенхімальних стовбурових клітин за мієлодиспластичних синдромів(Галич-Прес, 2025) Луніна, Карина; Пахаренко, Маргарита; Білько, Денис; Білько, НадіяМієлодиспластичний синдром (МДС) є групою гетерогенних захворювань, що характеризуються порушеннями процесів гемопоезу та прогресуючим дефіцитом клітин крові у кістковому мозку (КМ). Ці порушення виникають унаслідок аномалій у стовбурових клітинах кісткового мозку, що призводить до порушення їхнього диференціювання, проліферації та функціонування. Мезенхімальні стовбурові клітини як ключові регулятори мікросередовища КМ забезпечують підтримку гемопоетичних стовбурових клітин (ГСК), а також беруть участь у процесах імунної регуляції, ангіогенезу та відновлення тканин. Вивчення механізмів, які впливають на функціонування мезенхімальних стромальних клітин (МСК) за мієлодиспластичних синдромів, є важливим для розуміння патогенезу цих захворювань і розробки нових терапевтичних підходів. Саме тому метою стало вивчення функціональних особливостей мезенхімальних стровбурових клітин за МДС. У цій роботі ми аналізували зразки кісткового мозку, отримані від 7 пацієнтів з МДС.Item Assessments of radionuclides influence on Wistar rats' hematopoietic system using cell culture in vivo(Видавництво ЧНУ ім. Петра Могили, 2025) Russu, Iryna; Bilko, NadiyaThe aim of this work is determination of the influence of radionuclides strontium-90 and iodine-131 on the hematopoietic system of Wistar rats, after single and long-term internal exposure to ionizing radiation.Item Оцінка функціональної активності клітин-попередників кісткового мозку щурів Wistar за умов опромінення у різних дозах(Національний науковий центр радіаційної медицини Національної академії медичних наук України, 2021) Білько, Денис; Руссу, Ірина; Пахаренко, Маргарита; Снєжкова, Єлизавета; Родіонова, Наталія; Білько, НадіяМета дослідження: оцінка функціональної активності клітин-попередників кісткового мозку щурів Wistar, опромінених у різних дозах, із застосуванням культур клітин у дифузійних камерах in vivo та in vitro.Item Functional activity of hematopoietic stem and progenitor cells under the acute and chronic exposure to ionizing radiation in different doses(2021) Russu, Iryna; Bilko, NadiyaThe aim of the current study was investigation of functional properties of hematopoietic stem and progenitor cells of Balb/C mice under external acute and chronic exposure to irradiation in different doses.Item Хітозан-колагенові плівки для вирощування нащадків мезенхімальних стовбурових клітин(2013) Білько, Денис; Загородько, О.; Антонюк, Наталія; Колесник, Ірина; Борбуляк, ІринаРозроблено методику отримання плівок на основі хітозан-колагенових комплексів, придатних для вирощування нащадків мезенхімальних стовбурових клітин. Отримані плівки мають задовільні механічні та оптичні характеристики, що уможливлює їх використання як біосумісних матриць для культивування адгезивно залежних клітин. Експерименти in vivo показали, що отримані мембрани резорбують у організмі протягом 40 діб.Item Estimation of hematopoietic progenitor cells in patients with chronic myeloid leukemia with resistance to tyrosine kinase inhibitors(2023) Bilko, Nadiya; Dyagil, Iryna; Russu, IrynaChronic myeloid leukemia (CML) is a clonal oncological disease associated with the formation of chimeric bcr-abl gene, the product of which is active BCR-ABL tyrosine kinase playing a major role in the pathogenesis of CML. Data obtained in recent years allowed to assume the decisive role not only of hematopoietic stem cells, but also of bone marrow (BM) progenitor cells in both onset and progression of the disease. However, information on the functional characteristics of BM hematopoietic progenitor cells in different CML phases, in terms of therapeutic inhibition of BCR-ABL tyrosine kinase and the resistance to Imatinib, is not sufficient today and some findings are contradictory. Hence, the aim of this investigation was the estimation of BM hematopoietic progenitor cells in patients with CML with the resistance to tyrosine kinase inhibitors, using in vitro cell culture.Item Комплексна оцінка стану гемопоетичної системи лабораторних тварин в умовах внутрішнього опромінення стронцієм-90(2012) Борбуляк, Ірина; Родіонова, Н.; Білько, НадіяВ роботі досліджені особливості функціонування кровотворної системи на рівні стовбурової клітини і клітин-попередників щурів при дії радіонукліда 90Sr в умовах його тривалого і одноразового введення. В результаті культивування кровотворних клітин-попередників тварин, які зазнали внутрішнього опромінення 90Sr, виявлені такі особливості, як пригнічення колонієутворюючої здатності кровотворних клітин-попередників кісткового мозку в культурі і поява циркулюючих клітин-попередників у периферичній крові, що вказує на порушення основ гемопоезу. Показано, що в результаті впливу радіонукліда 90Sr відбувається пошкодження гемопоетичного мікрооточення, яке характеризується пригніченням колонієутворюючої активності стромальних кістковомозкових клітин-попередників і частковою втратою їх здатності до підтримки кровотворення в культурі у складі фідерного шару.