Role of the heparin-binding domain in intracellular trafficking of sHB-EGF

Simple item page
dc.contributor.authorKrynina, Olga
dc.contributor.authorManoilov, Kyrylo
dc.contributor.authorKolybo, Denys
dc.contributor.authorKomisarenko, Serhii
dc.date.accessioned2020-06-10T22:29:28Z
dc.date.available2020-06-10T22:29:28Z
dc.date.issued2019
dc.description.abstractHeparin-binding EGF-like growth factor (HB-EGF) is a member of the epidermal growth factor family that was proven as a potent mitogen and chemoattractant. HB-EGF mediated EGFR activation is a key event in the stimulation of gene expression, cell migration and proliferation during both normal and pathogenic physiological processes. The main goal of this research was to reveal the role of the heparin-binding domain of HB-EGF in the ligand-receptor formation and its further internalization to the cytoplasm. We used fluorescently-labeled recombinant derivative of soluble HB-EGF and its truncated form (sHB-EGFΔ84–106) with deletion of the heparin-binding domain. Firstly, the binding kinetics of two forms of sHB-EGF to its cell surface receptors was determined using flow cytometry. To determine how the absence of heparin-binding domain in the structure of HB-EGF affects its internalization, we analyzed the endocytosis process of EGFP-sHB-EGFΔ84–106 and EGFP-sHB-EGF complexes by confocal microscopy. It was found that the full-size form of HB-EGF is characterized by a lower intensity of translocation to the cytoplasm in comparison to HBD-deleted form. Thus, differences in the trafficking of the full-size or truncated forms of sHB-EGF in the cell cytoplasm may reflect the mechanisms of extracellular matrix influence on the biological activity of sHB‐EGF.en_US
dc.description.abstractГепаринзв’язувальний EGF-подібний фактор росту (HB-EGF) є представником сімейства епідермальних факторів росту, який є потужним мітогеном та атрактантом. HB-EGF-опосередкована активація EGFR є необхідною для стимуляції експресії генів, міграції та проліферації клітин як за нормальних, так і патогенних фізіологічних процесів. Основна мета цього дослідження полягала у визначенні ролі гепаринзв’язувального домену HB-EGF у процесі формування стабільного рецептор-лігандного комплексу та його подальшої інтерналізації до цитоплазми. Було використано флуоресцентно- мічене рекомбінантне похідне розчинного HB-EGF та його вкорочену форму (sHB-EGFΔ84-106) з делецією гепаринзв’язувального домену. Спочатку, з використанням протокової цитофлуориметрії, було визначено кінетику зв’язування двох форм sHB-EGF до його рецепторів на поверхні клітин. Для дослідження впливу відсутності гепаринзв’язувального домену в структурі HB-EGF на його інтерналізацію проаналізовано процес ендоцитозу EGFP-sHB-EGFΔ84-106 та EGFP-sHB-EGF за допомогою конфокальної мікроскопії. Виявлено, що повнорозмірна форма HB-EGF характеризується меншою інтенсивністю транслокації до цитоплазми порівняно з вкороченою формою sHB-EGF. Таким чином, відмінності у транспортуванні повнорозмірної або вкороченої форми sHB-EGF до клітинної цитоплазми можуть відображати механізми впливу позаклітинного матриксу на прояв біологічної активності sHB-EGF.uk_UA
dc.identifier.citationRole of the heparin-binding domain in intracellular trafficking of sHB-EGF / O. I. Krynina, K. Yu. Manoilov, D. V. Kolybo, S. V. Komisarenko // Ukrainian Biochemacal Journal. - 2019. - Vol. 91, Issue 4. - P. 26-32.en_US
dc.identifier.issn2409-4943
dc.identifier.urihttps://doi.org/10.15407/ubj91.04.026
dc.identifier.urihttps://ekmair.ukma.edu.ua/handle/123456789/17407
dc.language.isoenuk_UA
dc.relation.sourceUkrainian Biochemacal Journalen_US
dc.statusfirst publisheduk_UA
dc.subjectheparin-binding EGF-like growth factoren_US
dc.subjectepidermal growth factor receptoren_US
dc.subjectendocytosisen_US
dc.subjectarticleen_US
dc.subjectгепаринзв’язувальний EGF-подібний фактор ростуuk_UA
dc.subjectрецептор епідермального фактора ростуuk_UA
dc.subjectендоцитозuk_UA
dc.titleRole of the heparin-binding domain in intracellular trafficking of sHB-EGFen_US
dc.title.alternativeРоль гепаринзв’язувального домену у внутрішньоклітинному трафіку sHB-EGFuk_UA
dc.typeArticleuk_UA
Files
Original bundle
Now showing 1 - 1 of 1
Thumbnail Image
Name:
Role_of_the_heparin-binding_domain_in_intracellular_trafficking_of_sHB-EGF.pdf
Size:
1.12 MB
Format:
Adobe Portable Document Format
Description:
Download
License bundle
Now showing 1 - 1 of 1
No Thumbnail Available
Name:
license.txt
Size:
7.54 KB
Format:
Item-specific license agreed upon to submission
Description:
Download
Collections
Кафедра лабораторної діагностики біологічних систем